RELATIONS STRUCTURE-ACTIVITE DE LA NOCICEPTINE ET DE SON RECEPTEUR ORL1, UN NOUVEAU COUPLE EFFECTEUR-CIBLE DU SYSTEME NERVEUX CENTRAL
LE RECEPTEUR ORL1 EST UN NOUVEAU RECEPTEUR DE LA FAMILLE DES RECEPTEURS A 7 DOMAINES TRANSMEMBRANAIRES DONT LA STRUCTURE EST TRES PROCHE DE CELLE DES RECEPTEURS AUX OPIOIDES , , ET . L'ETUDE PHARMACOLOGIQUE REALISEE A L'AIDE DE SUBSTANCES OPIACEES ENDOGENES OU SYNTHETIQUES SUR DES CELLULES EUCARYOTES TRANSFECTEES AVEC LE RECEPTEUR ORL1 A PERMIS DE MONTRER QUE CE NOUVEAU RECEPTEUR N'EST PAS UN RECEPTEUR DES OPIOIDES CLASSIQUE. LE LIGAND ENDOGENE DU RECEPTEUR ORL1 A ETE ISOLE. IL S'AGIT D'UN PEPTIDE DE 17 ACIDES AMINES, PROCHE DANS SA STRUCTURE DE LA DYNORPHINE A, L'AGONISTE NATUREL DU RECEPTEUR AUX OPIOIDES DE TYPE . CONTRAIREMENT AUX PEPTIDES OPIOIDES, CE PEPTIDE EST DOTE D'UNE ACTIVITE PRONOCICEPTIVE LORSQU'IL EST INJECTE A DES ANIMAUX, C'EST POURQUOI IL A ETE APPELE NOCICEPTINE. L'OBJECTIF DE CE TRAVAIL DE THESE ETAIT D'ETUDIER, ET DE COMPRENDRE, COMMENT, AU NIVEAU MOLECULAIRE, RECEPTEUR ORL1 ET NOCICEPTINE SE RECONNAISSENT MUTUELLEMENT. NOUS AVONS DONC ETUDIE LES DOMAINES D'ORL1 QUI INTERAGISSENT AVEC LA NOCICEPTINE, ET RECIPROQUEMENT, LES DOMAINES DE LA NOCICEPTINE QUI INTERAGISSENT AVEC ORL. POUR CELA, NOUS AVONS DEVELOPPE UNE METHODOLOGIE UTILISANT DES PEPTIDES OU DES PROTEINES HYBRIDES. L'APPROCHE PAR LES LIGANDS HYBRIDES CONSTITUES DE PARTIES DE NOCICEPTINE ET DE PARTIES DE DYNORPHINE A, NOUS A PERMIS DE MONTRER QUE CES DEUX LIGANDS QUI PRESENTENT PLUSIEURS CARACTERISTIQUES COMMUNES, ONT DES DOMAINES FONCTIONNELS DIFFERENTS. NOUS AVONS MONTRE QUE LES ACIDES AMINES CHARGES SITUES AU MILIEU DE LA SEQUENCE DE LA NOCICEPTINE (POSITION 6 A 12) SONT NECESSAIRES POUR LA LIAISON ET L'ACTIVITE BIOLOGIQUE DE CE PEPTIDE, ALORS QUE POUR LA DYNORPHINE A, CE SONT LES 6 PREMIERS ACIDES AMINES N-TERMINAUX QUI SONT IMPORTANTS. DES RECEPTEURS HYBRIDES CONSTITUES DE PORTIONS DU RECEPTEUR ORL1 ET DE PARTIES DES RECEPTEURS AUX OPIOIDES DE TYPE , , OU , NOUS ONT PERMIS DE DELIMITER LE SITE DE LIAISON DE HAUTE AFFINITE DE LA NOCICEPTINE. LES RESULTATS OBTENUS ONT ETE DISCUTES EN TERMES DE MECANISME DE SELECTIVITE DES LIGANDS PAR LES BOUCLES EXTRACELLULAIRES DU RECEPTEUR ORL1 ET DES RECEPTEURS AUX OPIOIDES. NOUS AVONS PROPOSE PUIS VERIFIE EXPERIMENTALEMENT, QUE LA REGION D'ACTIVATION DU RECEPTEUR ORL1 EST CONSTITUEE PAR LA DEUXIEME BOUCLE EXTRACELLULAIRE.